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羅丹明123的使用!
更新時(shí)間:2021-10-29   點(diǎn)擊次數(shù):3980次

羅丹明123的使用!

丹明123 (Rhodamine 123、羅丹明123, Rh 123)是一種可以通過(guò)細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線(xiàn)粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光,多用于檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。它可以快速通過(guò)細(xì)胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線(xiàn)粒體所俘獲,并且對(duì)細(xì)胞沒(méi)有任何毒性。Rhodamine 123還用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色,包括植物細(xì)胞和細(xì)菌,由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rh123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,因此Rh123也被用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。

溶解性:

溶于乙醇,參考濃度1mg/ml。

溶液的配制

用DMSO溶解,終濃度為1-5 mM。溶液分裝,避光保存于-20 oC。

羅丹明123使用方法

1. 用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為 5×104~5×105個(gè)/mL。

2. 孵育該載玻片,用 PBS或Hank’s 液洗滌細(xì)胞。

3. 用培養(yǎng)基稀釋 Rh123母液以制備 1~20µM Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞濃度。

4. 將 Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時(shí)。

5. 去除 Rh123 緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞(洗滌細(xì)胞后為了固定,加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15~20 分鐘,接著用 PBS洗滌)。

6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞。

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。



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