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western blot (WB)實驗代測,為您提供以下服務!
更新時間:2019-07-24   點擊次數(shù):1769次

western blot (WB)實驗代測,為您提供以下服務!


免疫印跡(immunblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(western blot),他是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)在已成為蛋白分選的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡(western blot)常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分選。
 

Western blot的原理 
Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質(zhì),“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經(jīng)過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。 

 

以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。


Western blot樣本要求

客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品, 檢測目的蛋白的一抗(或由本公司代購)。樣品要求為:
 
1、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。
2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。
3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml。

 
Western blot結(jié)果及數(shù)據(jù)提供
內(nèi)參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張,可提供掃描圖,實驗報告,包括整個試驗流程所涉及的實驗數(shù)據(jù)和實驗步驟。如需進行蛋白純化服務,將提供檢測報告


服務內(nèi)容
我們提供從蛋白制備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務,如需要還可進行灰度分析。
說明
1、建議提供目的蛋白陽性表達樣品(純蛋白或有陽性表達的細胞或組織)作為陽性對照。
2、每張膜檢測1-8個樣品。
3、如果一抗由客戶提供,請在正確條件下保存,避免污染及反復凍融。
 
western blot (WB)服務須知: 
1. 樣本要求盡可能新鮮;
2. 樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細胞樣本,細胞數(shù)大于1×106;
3. 您可自備一抗,也可讓我公司代買。為保證質(zhì)量,抗體為進口單克隆抗體;
4. 服務時限和內(nèi)容:收到樣本之日起2-3周內(nèi)提交實驗結(jié)果,具體包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、圖片及相關(guān)分析數(shù)據(jù)等;
5. 報告提供:實驗結(jié)果將以電子或書面形式提交給您。

 

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