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TTC染色的相關知識
更新時間:2019-05-16   點擊次數(shù):3295次

   TTC染色是TTC和活細胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應,生成紅色的甲臜,用來表示細胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標。
   1原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復合物,1894年合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應,故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。
   2 取腦:可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦。因為腦組織未用多聚甲醛固定,所以較軟,取腦時更應仔細,保持大腦的完整性。
   3 -20度冰箱中速凍20分鐘左右,便于切片。
   4 切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。刀在腦前極與視交叉連線中點處;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間。(參考:張均田,主編.現(xiàn)代藥理試驗方法)。如果需計算面積的話,應切得均勻或用專門的腦槽。
   5將切片置于TTC中,常規(guī)濃度為2%,也有用1%或更低濃度的。
   6用錫箔紙蓋住后,放入37C溫箱15~30min,不時翻動腦片,使均勻接觸到染色液。也可以用將腦片放入多孔板,再滴入TTC,覆以圓形蓋玻片使均勻染色。
   7 染色后效果:為皮層下梗死。
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