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明膠酶譜法電泳試劑盒測定MMP2/9活性的小妙招!
更新時間:2018-12-07   點擊次數(shù):2040次

明膠酶譜法電泳試劑盒測定MMP2/9活性的小妙招!

 

大家在用明膠酶譜法測定MMP2/9活性的時候,總是會遇到一些不同的問題,現(xiàn)在我們就把實驗中的一下小貼士告訴大家,供大家參考。

1.做酶譜要測定樣品蛋白的濃度(同Western blot,建議用BCA法);

2.酶譜法是測定樣品中MMP-2、9活性的,如果煮沸使蛋白變性就沒有用了,故禁忌煮沸;

3.上樣緩沖液中也不能加β-巰基乙醇,這點由western blot轉作明膠酶譜的朋友切記、切記;

4.蛋白上樣量必須保證一樣,不會出現(xiàn)一致的透明條帶,如果不能保證上樣量一致,測出的相對活性也沒有統(tǒng)計分析的意義;

5.上樣時zui重要的一點,必須在4℃環(huán)境中操作,我用的是冰臺,同時所用的蛋白樣品(-80℃冰箱)不能是以前曾解凍使用過的,必須是新取出的,因為只要解凍就會有部分酶降解,影響你的結果。此外做過一次酶譜的蛋白樣品也不要反復使用,下次應使用其它已分裝、未解凍過的樣品;

6.電泳后的步驟很簡單,液體別配錯,照著方法做就可以了。

 

如果你曾做過Western blot,在這里恭喜你了,只要注意幾個小細節(jié),明膠酶譜對你非常簡單。

南京信帆生物代理銷售“基質金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒”,如果你有任何疑問,歡迎隨時咨詢。

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