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Zamboni固定液固定時間是多久
更新時間:2022-05-06   點擊次數(shù):891次

Zamboni固定液固定時間是多久


Zamboni-固定液(Zamboni Fluid)主要由PA、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,PA可沉淀蛋白引起組織收縮,但不會使組織硬化, 其與甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均勻,組織收縮輕微,對細胞的微細結(jié)構(gòu)顯示的很清晰,為一種良好的固定液。

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說明:固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。

用途:Zamboni-固定液是常用的混合型固定液之一,該固定液適用于電鏡免疫細胞化學,對超微結(jié)構(gòu)的保存較純甲醛為優(yōu),也適用于光鏡免疫細胞化學的研究。固定時間為6-18小時。


操作步驟:(僅供參考)

1. 按實驗具體要求操作。

2. 一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當延長固定時間,但不宜超過24h。

3. 固定后組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉(zhuǎn)入 70%的乙醇脫水,經(jīng)乙醇脫水時可除去大部分PA,組織留有一點黃色,對染色也無影響。


微波輻射固定組織。

組織固定的結(jié)果是組織中的蛋白質(zhì)凝固,以保存組織中原有的微細結(jié)構(gòu)。常規(guī)固定用的是甲醛或酒精等。但是這些固定劑從某些方面來說其穿透力不很強,因而需要較長時間的固定,另者,臨床上的冰凍切片,有的應(yīng)用快速加熱法預(yù)先固定組織,造成福爾馬林的極度揮發(fā),污染環(huán)境,影響人們的身體健康,因此尋找其它固定組織的方法就成為研究的重點。微波輻射固定組織,就是在這種情況下產(chǎn)生的。微波是一種具有能量的電磁波,在其運動期間可產(chǎn)生瞬間熱。由于微波的快速運動,也導(dǎo)致了物體部極性分子的快速運動,產(chǎn)生了熱量,致使組織蛋白凝固,因此,舊的叫法稱微輻射固定組織。按實際的應(yīng)稱為微波輻射凝固蛋白。




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